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脂肪细胞因子在血管钙化中的作用：机制与治疗前景
贺俊儒;肖大保;曾梦雅;袭祥文;陈跃武;血管钙化（vascular calcification， VC）是一种由细胞主动调控的病理过程，广泛存在于多种心血管疾病中，并明显增加心血管事件的发生率及全因死亡风险。作为重要的内分泌器官，脂肪组织可分泌多种脂肪细胞因子，在VC的发生和进展中发挥关键调控作用。不同脂肪细胞因子通过影响血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells， VSMCs）表型、炎症状态、氧化应激及矿化信号，在钙化过程中呈现促进或抑制的双向效应。本文综述了不同类型脂肪细胞因子在VC中的作用机制，并探讨其作为生物标志物与潜在治疗靶点的前景，有望为VC的精准干预提供思路。
GLS1在口腔鳞状细胞癌中对细胞增殖与铜死亡敏感性作用的初步探讨
朱丽凡;黎昌学;仵楠;孙二灿;代海涛;目的：检测谷氨酰胺酶1(glutaminase 1， GLS1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma， OSCC)中的表达，探究抑制GLS1表达对CAL-27细胞增殖与铜死亡敏感性的影响。方法：采用免疫组化染色技术检测60例OSCC组织和对应癌旁组织中GLS1蛋白的表达水平。使用Western blot和qRT-PCR实验检测GLS1在HOK和OSCC细胞中的表达差异，筛选出GLS1高表达细胞系(CAL-27)。将Si-RNA序列转染至CAL-27细胞中构建稳定沉默GLS1基因的细胞模型。通过CCK-8、划痕愈合、Transwell实验检测沉默GLS1基因对CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响。使用伊利司莫(elesclomol， ES)、铜离子(copper ion， Cu2+)和铜螯合剂四硫代钼酸铵(ammonium tetrathiomolybdate， TTM)单独及联合处理Si-GLS1(实验)组和Si-NC(阴性对照)组。采用CCK-8法检测细胞活性，评估其对铜死亡敏感性的变化。结果：GLS1在OSCC组织与OSCC细胞中呈现高表达且与肿瘤的分化程度相关(P<0.01)。沉默GLS1基因后可明显抑制CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。ES-Cu2+联合诱导CAL-27细胞可发生剂量依赖性死亡(P<0.05)。使用IC50浓度ES-Cu2+诱导CAL-27细胞发现抑制GLS1表达后，细胞增殖能力下降(P<0.05)。ES与Cu2+单独使用对细胞增殖的抑制效果并不明显(P>0.05)，TTM能够逆转ES-Cu2+对CAL-27细胞增殖的抑制效应(P<0.05)。结论：GLS1可能是OSCC的促癌基因，ES-Cu2+联合应用能有效诱导CAL-27细胞发生铜死亡。沉默GLS1基因可抑制CAL-27细胞的恶性生物学行为，增强细胞铜死亡敏感性。
三针裂盖伞水提物对斑马鱼的发育毒性
徐璐;谢智任;王一如;范宇光;张小坡;目的：本研究通过急性毒性实验初步确定了三针裂盖伞（Pseudosperma triaciculare）水提物对斑马鱼的发育毒性。方法：根据急性毒性实验中的最大非致死浓度（MNLC），进一步开展了胚胎暴露实验。将受精后4～6 h（4～6 hpf）的胚胎暴露于根据急性毒性阈值确定的不同浓度（45、133、400 μg/mL），监测自发运动、生存率、体长、心率、孵化率、鱼鳔充气、形态异常、组织学及游泳行为。结果：24 hpf 时自发运动随浓度升高显著下降，高剂量组完全丧失活动；高剂量组自48 hpf 起生存率下降，96 hpf 孵化率较对照下降 87.2%（P<0.001），72～120 hpf 心率降低15%～30%，体长发育受抑。96 hpf 鱼鳔缺失率由对照的42.5%升至高剂量组的98.8%（P<0.001），120 hpf仍维持47.5%。病理分析发现高剂量组鱼鳔结构塌陷并伴大量细胞浸润。120 hpf 时中高剂量组在恒定光照及光暗交替下游泳距离显著减少（P< 0.01，P<0.001），且与趋暗性无关。常见畸形包括心包水肿、卵黄囊吸收延迟、躯干弯曲和鱼鳔缺失，后者最为显著。结论：三针裂盖伞水提物对斑马鱼具有浓度依赖性的发育毒性，主要影响神经运动、心脏功能及鱼鳔形态发生。
SAA1通过活化NF-κB信号加剧糖尿病小鼠肾小球损伤
徐彬桅;杨喆;潘超;谢秋景;杜玉洁;洪艳;王琪;目的 探讨血清淀粉样蛋白A1(serumamyloidA1，SAA1)介导的核因子κB(nuclearfactor，NF)信号对2型糖尿病(type2diabetes，T2D)小鼠肾小球损伤的影响。方法 (1)将雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组，分别给予正常饮食(normaldiet，ND)或高脂饮食(high fatdiet，HFD)联合链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)诱导建立T2D模型，随后检测肾功能及SAA1表达。(2)将野生型(wildtype，WT)与SAA1基因敲除(SAA1-/-)小鼠分为四组：WT-ND、SAA1-/--ND、WT-HFD/STZ、SAA1-/--HFD/STZ。检测各组肾功能，并通过HE、PAS染色观察肾小球病理变化，采用免疫组织化学与Westernblot检测足细胞裂孔隔膜蛋白(nephrin、synaptopodin、WT-1、podocin)及NF-κB通路关键蛋白表达。(3)将MPC5细胞分为对照组、SAA1刺激组、SAA1+NF-κB抑制剂(BAY11-7082)组及BAY11-7082单独处理组，验证SAA1对MPC5细胞裂孔隔膜蛋白及NF-κB通路的影响。结果 (1)经HFD/STZ诱导的T2D小鼠出现明显的肾功能障碍，血清与肾小球中SAA1表达显著升高(P<0.05)。(2)在HFD/STZ诱导下，与WT小鼠相比，SAA1-/-小鼠的肾功能显著改善，肾小球病理损伤也明显减轻(P<0.05)；分子水平上，SAA1敲除促进了肾小球足细胞裂孔隔膜蛋白的表达，并抑制NF-κB信号的活化(P<0.05)。(3)在MPC5细胞中，SAA1刺激可下调MPC5细胞裂孔隔膜蛋白表达并激活NF-κB信号(P<0.01)，当使用NF-κB抑制剂BAY11-7082干预后，SAA1所诱导的上述有害效应被显著逆转(P<0.05)。结论 SAA1通过活化NF-κB信号，下调足细胞裂孔隔膜蛋白表达，从而加剧T2D小鼠的肾小球损伤。
基于巨噬细胞M2极化探讨四妙勇安汤改善糖尿病足溃疡愈合的机制研究
王茜;刘岐;王烨;黄艳洪;目的：观察四妙勇安汤对信号素3C（Semaphorin 3C，SEMA3C）/神经纤毛蛋白-2（Neuropilin-2，NRP2）/Hedgehog通路介导的巨噬细胞M2极化及成纤维细胞功能的影响，从而阐明改善糖尿病足溃疡的分子机制。方法：采用高糖联合IL-4诱导RAW264.7巨噬细胞建立体外糖尿病模型，并给予不同浓度四妙勇安汤含药血清干预。通过流式细胞术、ELISA、Western blot和RT-qPCR技术检测巨噬细胞M2极化标志物及SEMA3C/NRP2/Hedgehog通路关键分子表达。采用Transwell、CCK-8和Western blot法检测经巨噬细胞条件培养基处理的成纤维细胞迁移、增殖能力和细胞外基质相关蛋白的表达。结果：与模型组相比，四妙勇安汤含药血清显著提高了巨噬细胞CD206阳性率、Arg-1蛋白表达及IL-10分泌水平（P<0.01），并剂量依赖性上调SEMA3C、NRP2和Gli1的mRNA和蛋白表达（P <0.01）。此外，四妙勇安汤组条件培养基显著增强了成纤维细胞的增殖、迁移能力及α-SMA、Fibronectin、Laminin和MMP-2蛋白表达（P<0.01）。结论：四妙勇安汤可能通过激活SEMA3C/NRP2/Hedgehog信号通路促进巨噬细胞M2极化，进而改善成纤维功能与细胞外基质重塑，从而加速糖尿病足溃疡愈合。
小脑在癫痫及其神经调控中的多模态影像学研究进展
崔雪朦;刘婷;叶富跃;鲁罗京;龚川景;梁斌基;李丽娟;李其富;目前癫痫被认为是一种大脑网络功能紊乱的慢性神经系统疾病，然而其疾病机制尚未完全阐明。早有动物实验表明小脑与癫痫发作之间存在密切联系，并记录小脑的痫样电活动。磁共振研究发现，在癫痫患者中小脑存在明显的结构萎缩、局部功能障碍与重组以及局部代谢改变，并可能参与癫痫的药物抵抗和共患认知障碍。小脑在癫痫发作过程中的角色是复杂的，既可能是“加害者”也可能是“受害者”，其机制可能与小脑-丘脑-皮层环路（CTC环路）的结构和功能变化紧密关联。基于此，靶向小脑的癫痫神经调控治疗具有极大的潜力，可以尝试作为单一或联合治疗方案控制癫痫的发作。因此，本文围绕小脑在癫痫发作中的复杂作用，从电生理、脑结构、脑功能、脑代谢和重要的CTC环路角度综述小脑参与癫痫疾病、药物抵抗和认知共患病背后潜在的多模态机制，并进一步为癫痫的神经调控治疗提供理论依据。
4-二乙氨基苯甲醛诱导肠道屏障稳态失调的机制研究
蓝楠;唐红梅;李柏均;李月蛟;王孝芸;袁谢芳;目的：探讨4-二乙氨基苯甲醛(4-diethylaminobenzaldehyde， DEAB)对小鼠肠道上皮屏障的影响，研究相关分子机制。方法：12只成年雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组及DEAB组。DEAB组给予10mg·kg-1·bw-1DEAB腹腔注射，对照组给予玉米油腹腔注射。7 d后，采用H&E染色和PAS染色观察小鼠肠道组织病理形态表现；组织荧光染色检测肠道上皮组织Lgr5、ZO-1蛋白表达量；RT-PCR检测肠道上皮细胞IL-22、Reg3γ、Reg3β、Lgr5的mRNA表达量；流式细胞术检测肠道固有层淋巴细胞中CD11c+MHCII+细胞、CD3+细胞数量；平板法检测肠系膜淋巴结及脾脏载菌量。结果：相较于对照组，DEAB组小鼠肠绒毛长度明显缩短，肠道炎症细胞明显增多，杯状细胞明显减少(P<0.05)；肠道上皮隐窝Lgr5蛋白及ZO-1蛋白表达明显减少(P<0.01)；小鼠肠道上皮组织细胞IL-22、Reg3γ、Reg3β mRNA表达水平明显升高(P<0.05)，而Lgr5 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)；小鼠肠道固有层淋巴细胞中CD11c+MHCII+细胞和CD3+细胞数量明显增多(P<0.05)；小鼠肠系膜淋巴结以及脾脏载菌量明显升高(P<0.01)。结论：视黄酸代谢通路失调导致肠道免疫细胞数量异常，肠道屏障功能受损，细菌感染风险增加，其机制可能与Lgr5蛋白表达失调及紧密连接破坏有关。
探究芩百清肺浓缩丸通过支原体毒素D1介导的核糖基化调控CCR5路径治疗肺炎的研究
张海峰;尹俪桥;孙一;马鸿菲;葛学林;梁爽;王萍;王晓溪;王欣;蒙艳丽;王伟明;目的：基于肺炎支原体毒素D1介导的G蛋白偶联受体CCR5核糖基化，探究芩百清肺浓缩丸（芩百丸）调控免疫炎症的研究。方法：使用基因工程中蛋白表达的方法，将D1毒素蛋白表达纯化，然后进行Biacore分子互作实验，检测芩百丸与community acquired respiratory distress syndrome toxin D1（CARDsTx D1）间的亲和力。动物实验将60只SPF级BALB/c小鼠，雌雄各半，随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组（阿奇霉素32.00 mg/kg）组、芩百丸低剂量（1.15g/kg）组、芩百丸中剂量（2.30 g/kg）组、芩百丸高剂量（4.60 g/kg）组，每组10只。除空白对照组外，其他组小鼠感染肺炎支原体，阳性对照组，芩百丸低、中、高组分别给予相应药物7 d，苏木素-伊红染色（H&E）观察病理变化，肺泡灌洗液涂片迪夫染色观察肺部炎症细胞状态，ELISA检测小鼠血清中NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3（NOD-like receptor family pyrin domain containing 3，NLRP3）的表达水平，免疫组化观察CCR5、mTORC1、Akt、P-Akt蛋白在肺组织上的表达，qRT-PCR检测CCR5、mTORC1的mRNA的表达情况。体外试验：利用人支气管上皮细胞（Beas-2B）探究芩百丸对Akt信号通路的影响。结果：D1蛋白的表达与纯化：将获取的pET-28a-CARDsTx D1成功转化入大肠杆菌中，经过诱导表达成功获得大量分子量约为23.6 kDa的目的蛋白，根据SDS-PAGE的结果证明，获得了较高纯度的目的蛋白。D1蛋白的分子结合实验：Biacore实验结果证明芩百丸与D1之间结合值为28.2 RU，存在分子间相互作用。体内试验结果：与模型组相比，芩百丸高剂量组小鼠肺组织结构更加清晰，炎症细胞相对减少，充血部位有所改善，小鼠咳嗽次数减少；与模型组相比，芩百丸高剂量组小鼠肺组织CCR5表达明显降低（P<0.05），mTORC、Akt、P-Akt表达明显升高（P<0.05）；与模型组相比，芩百丸高剂量组小鼠血清中NLRP3表达明显降低（P<0.05），体外试验：芩百丸能促进Akt信号通路的表达。结论：芩百丸通过CCR5路径来调控肺炎支原体小鼠的免疫炎症反应，此研究旨在为新药研发提供理论支持。
肠道菌群在银屑病发病机制与治疗中的研究进展
兰能静;李俊琴;李新华;银屑病是一种由遗传与环境因素共同作用的免疫紊乱性皮肤病。基于“肠-皮肤轴”理论，肠道菌群失调在皮肤疾病中的作用被逐渐关注。本综述系统阐述肠道菌群失调如何通过介导免疫稳态失衡、诱发屏障损伤、触发炎症级联反应以及干扰皮肤菌群等多重机制，驱动皮肤病理进程。银屑病患者肠道菌群存在失调，其失衡状态通过介导Th17/Treg 失衡与宿主代谢异常等机制，加剧了病理进程。临床证据表明，增加肠道有益菌、抑制肠球菌与肠杆菌及移植健康粪便微生物（FMT）可显著降低银屑病面积与严重程度指数（PASI）。未来研究应着力于解析菌群-宿主互作分子网络，并构建基于微生物组特征的分层治疗策略，为银屑病治疗提供新靶点。
不同分子量透明质酸对关节滑膜细胞炎症及迁移能力的影响
侯心雨;於怀龙;刘英梅;刘飞;邵华荣;凌沛学;目的：探讨不同分子量透明质酸（HA）对脂多糖（LPS）诱导的滑膜细胞（FLS）炎症反应及迁移能力的影响。方法：采用LPS刺激FLS细胞建立炎症模型，将FLS细胞分为control组、LPS组及不同分子量HA组，包括HA-O（4 kDa）、HA-L（50 kDa）、HA-M（200 kDa）、HA-H（1 250 kDa）和HA-G（2 000 kDa）。通过CCK-8法检测细胞活力，划痕实验评估细胞迁移，DAF-FM DA荧光染色与Griess试剂法检测一氧化氮（NO）释放，qRT-PCR和Western blot检测TNF-α、IL-6、IL-1β的mRNA和蛋白水平表达，ELISA法检测上述炎症因子含量。结果：与control组相比，LPS组细胞迁移能力降低，NO释放升高（P<0.0 001），TNF-α、IL-6、IL-1β 表达升高（P<0.01）。与LPS组相比，HA-O组细胞迁移能力升高（P<0.05），TNF-α表达升高，NO释放及IL-6、IL-1β表达降低；HA-L与HA-M组细胞迁移能力降低，NO释放及炎性因子表达降低（P<0.0 001）；HA-H与HA-G组细胞迁移能力、NO释放及炎性因子表达明显降低（P<0.0 001）。CCK-8结果显示，HA-O抑制细胞活力，而HA-L、HA-M、HA-H、HA-G促进细胞增殖。结论：低、中、高分子量HA可抑制炎症状态下FLS的迁移及炎症反应，而寡聚HA可能具有促炎与促迁移作用。