- 晏庆;郭蓁;孙赛男;黎婧;谭机永;黎静;
目的：探讨山茶油对H_2O_2诱导大鼠H9C2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：CCK8法检测不同浓度H_2O_2处理H9C2心肌细胞后细胞存活率，以正常培养的细胞为空白对照组，以200μmol/L H_2O_2处理细胞24 h，构建氧化应激损伤模型作为模型组。分别用1%,0.1%,0.01%浓度的山茶油预处理细胞24 h后，加入H_2O_2作用24 h作为实验组。利用β-半乳糖苷酶衰老染色实验，线粒体膜电位实验，EdU细胞增殖染色实验及划痕实验来观察各组细胞衰老，线粒体膜电位，增殖凋亡，迁移的变化。利用试剂盒检测各组细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性、乳酸脱氢酶（LDH）活性、丙二醛（MDA）含量。结果：不同浓度H_2O_2处理H9C2心肌细胞后，细胞活力均受到抑制，且与H_2O_2浓度正相关（P<0.01）。与空白对照组相比，H_2O_2模型组细胞衰老阳性率、MDA含量和LDH活性增加（P<0.01）；线粒体膜电位、细胞增值率、迁移率、SOD活性下降（P<0.01）。与H_2O_2模型组相比，实验组细胞衰老阳性率（P<0.05）、MDA含量和LDH活性降低（P<0.05）；线粒体膜电位增加、细胞增殖率和迁移率增加（P<0.05）。结论：山茶油可显著抑制H9C2细胞的氧化应激损伤，发挥心肌细胞保护作用。
2024年01期 v.30;No.344 1-7页 [查看摘要][在线阅读][下载 2365K] [下载次数：1077 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：6 ] - 康碧倩;李悦;何晓璇;肖振;胡睿;罗陈亮;乔明宇;吴桂有;李振中;朱晓莹;黄忠仕;
目的：探讨二苯乙烯苷（TSG）经PI3K/AKT通路对冈田酸诱导的人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）凋亡的影响及调控机制。方法：CCK-8法筛选OA最佳浓度，将SH-SY5Y细胞分为对照组、模型组、TSG组、 LY294002组和LY294002+TSG组。通过CCK-8法和TUNEL法检测各组细胞增殖和凋亡情况；Western blotting法和qRT-PCR法检测PI3K、P-PI3K(Y607)、AKT、P-AKT(Ser473)、Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达情况，通路及凋亡蛋白相对表达量以P-PI3K(Y607)/PI3K、P-AKT(Ser473)/AKT、Bcl-2/Bax灰度比值表示。结果：OA最佳处理浓度为40 nmol/L。与对照组相比，模型组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，通路及凋亡蛋白、PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA表达水平降低，Bax mRNA表达水平升高（均P<0.05）；与模型组相比，TSG组细胞活力升高，细胞凋亡率降低，通路及凋亡蛋白、PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA相对表达水平升高，Bax mRNA表达水平降低（均P<0.05）,LY294002组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，P-PI3K(Y607)/PI3K蛋白表达水平显著降低（P<0.05）、P-AKT(Ser473)/AKT、Bcl-2/Bax蛋白表达水平较明显降低，但未有统计学意义，PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA表达水平降低，Bax mRNA表达水平升高（均P<0.05）；与LY294002组相比，LY294002+TSG组细胞活力升高，细胞凋亡率降低，通路及凋亡蛋白相对表达水平、PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA升高，Bax mRNA表达水平降低（均P<0.05）。结论：二苯乙烯苷可能通过干预PI3K/AKT信号通路，进而调节Bcl-2、Bax等凋亡因子的表达，从而缓解冈田酸诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。
2024年01期 v.30;No.344 8-14页 [查看摘要][在线阅读][下载 1377K] [下载次数：550 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：4 ] - 吕川;朱慧志;刘向国;曹晓梅;夏咏琪;张秋萍;余子奇;
目的：研究阳和平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑及白细胞介素-6(IL-6)/Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录活化因子3(STAT3)信号轴在其中的作用机制。方法：选取健康雄性SD大鼠42只，随机数字法分为正常对照组7只与造模组35只，造模组采用卵清蛋白（OVA）联合氢氧化铝腹腔注射2周的方式进行致敏，正常对照组采用等量的生理盐水；2周后将造模组随机分为模型组、阳和平喘高、中、低剂量组和地塞米松组，每组7只；后4周采用OVA雾化+灌胃的方式进行激发和治疗，阳和平喘高中低组每日分别予以15.48、7.74、3.87 g/kg阳和平喘颗粒灌胃，地塞米松组予以0.062 5 mg/kg地塞米松进行灌胃，其余组灌胃等量生理盐水。HE、PAS、Masson染色观察大鼠肺组织病理学变化；ELISA检测大鼠血清中IL-6、IL-23、IL-17A水平；Western blot检测肺组织中JAK-2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3蛋白表达量；qRT-PCR检测大鼠肺组织中IL-6、JAK2、STAT3的mRNA水平。结果：与正常对照组比较，模型组大鼠肺组织有大量炎性细胞浸润，杯状细胞增生、上皮下胶原纤维沉积、气道上皮增厚较为明显；血清中IL-6、IL-23、IL-17A水平显著升高（P<0.01），肺组织JAK-2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3的蛋白表达量和IL-6、JAK2、STAT3的mRNA表达水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，各给药组炎性细胞浸润、杯状细胞增生、上皮下胶原纤维沉积、气道上皮增厚程度明显减轻，血清中IL-6、IL-23、IL-17A水平显著降低（P<0.01），肺组织JAK-2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3的蛋白表达量和IL-6、JAK2、STAT3的mRNA水平显著降低（P<0.01）。结论：阳和平喘颗粒可明显缓解哮喘大鼠气道重塑，其机制可能是通过抑制IL-6/JAK2/STAT3信号轴发挥作用。
2024年01期 v.30;No.344 15-20+28页 [查看摘要][在线阅读][下载 2340K] [下载次数：775 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：20 ] |[阅读次数：3 ] - 郭展宏;居悦俊;沈婷;张琳琪;盛忠奇;吴润泽;孔颖宏;
目的：探究胃饥饿素通过调控miR-455-5p影响肝细胞胰岛素敏感性的作用机制。方法：采用高糖构建HepG2细胞胰岛素抵抗模型，造模成功后使用去酰基化胃饥饿素（DAG,1μmol/L）干预，分别转染miR-455-5p模拟物（miR-455-5p mimic）或对照物（NC mimic）。检测各组细胞葡萄糖消耗量和细胞内糖原含量。采用荧光原位杂交分析HepG2细胞内miR-455-5p表达水平。应用生物信息学分析、荧光素酶报告基因实验来鉴定与miR-455-5p结合的靶基因，Western Blot检测IGF-1R/PI3K/Akt信号通路的表达水平。结果：在胰岛素抵抗HepG2细胞中，miR-455-5p的表达水平显著上调，葡萄糖消耗量和细胞内糖原含量均明显降低。DAG干预后细胞葡萄糖消耗量和细胞内糖原含量增加，miR-455-5p的表达水平下调，IGF-1R/PI3K/Akt信号通路被激活。生物信息学分析表明IGF-1R是miR-455-5p的靶基因。双荧光素酶报告基因检测、miR-455-5p模拟物和抑制剂转染证实DAG通过抑制miR-455-5p从而激活IGF-1R/PI3K/Akt信号通路。结论：DAG通过miR-455-5p介导的IGF-1R/PI3K/Akt信号通路激活并改善胰岛素抵抗，表明抑制miR-455-5p或外源性补充DAG可能是T2DM治疗的潜在靶点。
2024年01期 v.30;No.344 21-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 2067K] [下载次数：281 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：4 ] - 赵传志;丁慧敏;胡紫晴;都永勤;周兰;周鹏;王靓;
目的：通过体内动物实验探究苓桂术甘汤对非酒精性脂肪肝病的治疗效果，网络药理学及分子对接技术探究苓桂术甘汤干预非酒精性脂肪肝病的作用机制。方法：高脂喂养20周建立非酒精性脂肪肝病大鼠模型，将大鼠分为6组，正常组、模型组、辛伐他汀组（4 mg/kg）、苓桂术甘汤低剂量组（2.1 g/kg）、苓桂术甘汤中剂量组（4.2 g/kg）、苓桂术甘汤高剂量组（8.4 g/kg），观察苓桂术甘汤干预后的HE染色及油红O染色的肝脏形态学变化，酶标仪检测血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶、血脂四项水平。利用网络药理学结合分子对接筛选苓桂术甘汤干预非酒精性脂肪肝病潜在作用机制及靶点。结果：苓桂术甘汤可显著改善模型大鼠的谷草转氨酶、谷丙转氨酶水平（P<0.05）;HE染色和油红O染色显示苓桂术甘汤显著降低模型组大鼠的肝脏脂质沉积；苓桂术甘汤可显著降低模型大鼠血脂四项水平（P<0.05）；网络药理学筛选出关键靶点10个，关键信号通路5条；分子对接结果表明前20活性成分均对前十靶点有良好结合能力。结论：表明苓桂术甘汤对非酒精性脂肪肝病有调节血脂及改善肝组织病变作用，并初步验证了苓桂术甘汤对脂质代谢相关基因的调控作用。
2024年01期 v.30;No.344 29-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 6181K] [下载次数：1207 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：16 ] |[阅读次数：3 ] - 张华雄;张明惠;李红燕;
目的：基于生物信息学、网络药理学及分子对接技术探究薯蓣皂苷治疗阿尔茨海默病（alzheimer disease, AD）和新型冠状病毒肺炎（coronavirus disease 2019,COVID-19）的靶点。方法：利用生物信息学对AD和COVID-19的共有的差异表达基因（differential expression gene,DEGs）进行富集分析。接着，通过转录因子（transcription Factor, TF）调控网络分析，并利用Cytoscape使其网络可视化，进一步通过DGIdb数据库预测能同时治疗AD和COVID-19的药物，与CTD数据库中AD、COVID-19相关治疗药物进行韦恩图分析，确定薯蓣皂苷作为治疗AD、COVID-19的潜在药物。使用SEA、SuperPred、SwissTargetPrediction、TCMSP对薯蓣皂苷进行靶点预测，并将其分别与AD、COVID-19的DEGs进行韦恩图交集分析，确定薯蓣皂苷治疗AD、COVID-19的靶点，对其进行基因本体论（Gene Ontology,GO）、京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）富集分析，并构建这些药物靶点的蛋白相互作用（Protein Protein Interaction,PPI）网络，筛选出关联度最高的核心靶点。利用分子对接分析薯蓣皂苷与这些核心靶点的结合情况。结果：通过富集和聚类分析，发现AD、COVID-19共有DEGs所富集的生物过程、通路、疾病均与炎症和免疫调节相关。利用这些共有DEGs与Trust数据库构建了AD和COVID-19 TFs调控网络。通过网络药理学预测到薯蓣皂苷是治疗AD和COVID-19的潜在药物，并揭示了薯蓣皂苷治疗AD的36个靶点和27个治疗COVID-19的靶点。用CytohHubba计算得分，分别选取各自关联度最高的6个的核心靶点与薯蓣皂苷进行分子对接。结论：本研究首次揭示了AD和COVID-19共有TFs调控网络，预测并验证了薯蓣皂苷是治疗AD和COVID-19的潜在药物。且通过分子对接确定了薯蓣皂苷与治疗AD和COVID-19的核心药理靶点的结合情况，为开辟临床治疗AD和COVID-19新的途径提供了理论依据。
2024年01期 v.30;No.344 39-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 4084K] [下载次数：547 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 杨敏;卢健棋;庞延;周家谭;罗文宽;
目的：对常规西药联合芪苈强心胶囊与单用西药治疗慢性心力衰竭的临床疗效进行比较，证明芪苈强心胶囊联合西药治疗更具优势，为慢性心衰的临床治疗策略提供参考依据。方法：检索PubMed、Embase、Web of science、中国知网（CNKI）、万方（WanFang）、维普（VIP）、中国生物医学文献（CBM）等数据库中常规西药治疗以及西药联合芪苈强心胶囊治疗慢性心衰的随机对照实验（RCTs），采用Cochrance推荐的RCT的工具进行偏倚风险评估后，用Rev Man 5.4及Stata 17软件进行Meta分析。比较常规西药联合芪苈强心胶囊组（以下简称治疗组）与常规西药组（以下简称对照组）的心功能疗效评价、左室射血分数（LVEF）、左室舒张末期内径（LVEDD）、心脏每搏输出量（SV）、6 min步行试验（6MWT）距离及N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）指数。结果：纳入符合标准的RCTs共20篇，包括2 953例患者，其中治疗组1 508例，对照组1445例。Meta分析结果显示，治疗组的心功能疗效评价、LVEF、LVEDD、SV、6MWT及NT-proBNP改善情况均显著优于对照组。其中心功能疗效评价（OR=2.09,95%CI:1.71～2.55,P<0.001）、LVEF(WMD=7.05,95%CI:5.30～8.79,P<0.00001)、LVEDD(WMD=6.73,95%CI:3.18～10.29,P=0.0002)、SV(WMD=6.73,95%CI:3.18～10.29,P=0.0002)、6MWT(SMD=0.70,95%CI:0.54～0.87,P<0.000 01)、NT-proBNP(SMD=-1.95,95%CI：-2.52～-1.38,P<0.000 1)，差异均有统计学意义。结论：常规西药联合芪苈强心胶囊能显著提高心力衰竭的临床疗效，改善LVEF、LVEDD、SV及NT-proBNP指数，提高运动耐量，在治疗中值得借鉴。
2024年01期 v.30;No.344 50-59页 [查看摘要][在线阅读][下载 3217K] [下载次数：448 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：5 ]